生化分析儀是細胞培養(yǎng)過程中開展生化檢測工作的重要設(shè)備，長期以來，我國細胞培養(yǎng)行業(yè)所用的動生化分析儀主要依賴進口，在生物制藥企業(yè)研發(fā)中心、中試車間、生產(chǎn)車間所用的生化分析儀幾乎全部使用進口設(shè)備。近期，深圳西爾曼公司推出了首款國產(chǎn)M-900全自動細胞培養(yǎng)生化分析儀，其檢測項目達到了11測試（配置ISE模塊），在本領(lǐng)域填補了國內(nèi)空白。本測評通過一系列實驗，以及在監(jiān)測模擬常規(guī)檢測環(huán)境下儀器的運轉(zhuǎn)情況，驗證該款生化分析儀的檢測性能及在細胞行業(yè)的應(yīng)用能力。

1  材料：

1.1 細胞培養(yǎng)液樣本：某大型制藥公司CHO細胞培養(yǎng)液

1.2 儀器與試劑：

1.2.1儀器：西爾曼科技M-900生化分析儀

1.2.2試劑：葡萄糖、乳酸、谷氨酸標準品由自西爾曼科技提供，谷氨酰胺、葡萄糖、硫酸銨分析純試劑購自于Sigma

2  檢測原理：

    所有檢測項目上機參數(shù)均按照原廠家配套說明書設(shè)置，檢測方法：葡萄糖、乳酸、谷氨酸、谷氨酰胺采用氧化酶-電極法；鈉、鉀、鈣、銨離子采用離子選擇性電極法

3  性能驗證方法：

3.1精密度驗證：

選用深圳市西爾曼公司標準液測試儀器精密度（或者選用國家標準質(zhì)控液）。分析儀在正常條件下按常規(guī)測試程序先行定標，然后對標準液連續(xù)測定10次，分別求取定值參考物質(zhì)內(nèi)各分析元素測定值的均值和標準差,計算各分析元素的變異系數(shù)（CV）

3.2 正確度驗證：

選用深圳市西爾曼公司標準液進行準確度測試.（或者選用國家標準質(zhì)控液）分析儀在正常條件下按測試程序先行定標，然后對標準液連續(xù)測定5次，分別求取標準液內(nèi)各分析元素測定值的均值，計算各分析元素測定值與參考物質(zhì)定值的偏差(B)

3.3 測量范圍驗證：

選擇高值濃度標本（H，高值標本濃度盡量接近線性范圍的上限）和低值濃度標本（L）各1 份，濃度范圍要覆蓋儀器說明書給出的線性范圍。將高值濃度標本與低值濃度標本分別按L、1H+4L、2H+3L、3H+2L、4H+1L、H 的比例混合，配成 6 份不同濃度的標本，隨機排列，每份混合血清標本測定2 次，記錄結(jié)果。將實測值與預(yù)期值進行回歸分析。若所有實驗點在坐標紙上呈明顯直線趨勢，用直線回歸對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計，得直線回歸方程Y＝a X+b，同時計算相關(guān)系數(shù)r。

3.4方法比對驗證：

每天選取8份細胞培養(yǎng)液樣本，分別用使用cedex bio為對照系統(tǒng)和M-900為實驗系統(tǒng)，對上述各組標本按l～8順序和8～l順序重復(fù)測定，5 d完成。記錄測定結(jié)果，計算每份標本每種方法測定結(jié)果均值，重復(fù)測定值間差值的絕對值以及2套檢測系統(tǒng)測定結(jié)果均值間的差值。

4. 結(jié)果：

4.1 精密度正確度驗證：

4.2 測量范圍驗證結(jié)果：

4.3 方法對比驗證：

4.3.1葡萄糖標準試劑檢測對比：

4.3.2 細胞樣本檢測數(shù)據(jù)：

原始數(shù)據(jù)涉及工藝保密，不便于公開，相關(guān)性分析根據(jù)原始數(shù)據(jù)分析

4.3.3 梯度稀釋實驗結(jié)果：

將配套的標準液葡萄糖：1.00g/L，乳酸：11.11mmol/L按比例稀釋后的樣品分別連續(xù)測量三次葡萄糖、乳酸含量，分析所得數(shù)據(jù)誤差、標準偏差。

4.3.3 梯度稀釋實驗結(jié)果：

5. 結(jié)論：

    M-900生化分析儀在細胞培養(yǎng)工作環(huán)境下，在常開機狀態(tài)下，每天工作時間為4h，評價共計28d。平均檢測數(shù)樣本為150個／d，檢測項目數(shù)6項目／d，檢測速度約為60個樣本/小時與廠家聲明的檢測速度基本一致。評價期間出現(xiàn)故障報警2次，系統(tǒng)恢復(fù)所需時間為10 min，故障性質(zhì)均為軟件缺陷，工程師對軟件版本進行升級后故障未重復(fù)出現(xiàn)，整個評估實驗過程中未出現(xiàn)儀器硬件故障。另外對儀器常規(guī)操作合理性和便捷程度的判斷、對儀器檢測速度的判斷、儀器日常保養(yǎng)操作情況的判斷以及日常故障情況的判斷。通過一個月左右的使用，了解到西爾曼M-900生化分析儀日常操作合理便捷；日常保養(yǎng)設(shè)計合理，保養(yǎng)過程操作簡便，相對于光學(xué)比色法，M-900生化分析儀檢測速度更快，可滿足儀器常規(guī)使用的要求；儀器故障發(fā)生率較低，硬件部分在整個試用過程中未出現(xiàn)故障，軟件部分雖有故障發(fā)生，但隨著軟件版本的升級，在試用的后期也趨于穩(wěn)定，未再出現(xiàn)影響檢測的故障。綜合以上實驗結(jié)論，國產(chǎn)生化分析儀M一900的檢測性能能夠滿足日常細胞培養(yǎng)生化檢測的要求，使用簡便，運行穩(wěn)定，故障率低，可以滿足日平均樣本量在300個測試的細胞培養(yǎng)生化檢測需求。